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BiWriter 外泌體分離純化儀集成度高：

     1、集成自動化臭氧滅菌功能，實現(xiàn)自動化滅菌；

     2、集成制冷功能，保持外泌體活性；

     3、先進的傳感器與操控系統(tǒng)結合，具備自適應過濾壓力調控功能，維持高效的外泌體切向流過濾；

     4、自動樣品回收功能，一鍵操控濃縮后外泌體的回收；

     5、過濾效率高，1H 內完成 500mL 細胞上清液的 20 倍外泌體濃縮富集，4L 內完成 2L 細胞上清的 10 倍外泌體濃縮富集。

BiWriter 外泌體分離純化儀采用 TFF 分離方法：

外泌體分離方法比較

  相比于超速離心法、尺寸排阻色譜法、免疫親和法、微流控芯片法，超濾法是目前外泌體濃縮分離的最高效方法。鑒于普通超濾容易因濾膜孔堵塞導致難以有效過濾，切向流超濾改變膜表面流體特性可有效減少濾膜孔堵塞，是超濾法中最具商業(yè)應用價值的外泌體分離方法。

BiWriter 外泌體分離純化儀與國內同類型儀器比較

3.1 、如上圖紅框部分所示，選擇要清洗的液體總量（如 300ml，500ml）。

3.2 、在滅菌瓶中加入超過清洗量的去離子水（或瓶裝娃哈哈純凈水），并將滅菌瓶放在屏幕后的載物臺上。

3.3 、點擊紅框部分的“START”按鍵，啟動儀器的膜與管路清洗功能。

3.4 、清洗完畢后，界面會顯示清洗完畢提示即表示已經完成清洗。

4、 過濾前儀器的自動化滅菌

4.1 、滅菌瓶中裝入 500ml 的去離子水（或瓶裝娃哈哈純凈水），瓶蓋不得擰緊，保證可將瓶內的氣體排??（滅菌時會產生臭氧）。

4.2 、為保證管路連接處的無菌，可在滅菌前，將 1，2，3，4，5 號管路接口噴上 3%過氧化氫，進行連接處的滅菌。

4.3 、將 5 號管路連接到滅菌瓶的回流管。

4.4 、紅框部位點擊選擇滅菌時間，推薦時長為“120min”。點擊紅框內的“START”按鍵，啟動滅菌程序。

4.5 、滅菌原理：儀器會自動產生臭氧經 0.22μm 濾膜，通過管道 6 進入射流器，與管路內的去離子水均勻混合制備??臭氧水。而后儀器自動開啟或關閉管路，將所有的管路進行滅菌。

4.6 、如最求快速滅菌可在滅菌瓶中加入 3%過氧化氫，選擇“60min”進行快速滅菌。

4.7 、滅菌過程可觀察過濾隔板兩側是否有液體流??并再次交叉擰緊 2個手輪（膜裝載時如直接手擰手輪，由于有空氣存在導致的擰緊過程中壓合效果不是十分理想）。

5、 過濾隔板的耐壓測試

5.1 、點擊屏幕右上角的藍色按鍵，切換屏幕至過“RUN SETTING”液面，直接點擊“START”按鍵，進行壓力測試。

5.2 、運行儀器 5min，期間觀察是否有液體從過濾隔板滲??。如有液體滲??，則反復擰緊 2 個手輪，至液體不再滲??。

5.3 、點擊“STOP”按鍵，結束壓力測試。通過點擊 2 次右上角的切屏按鍵，跳轉回“Filter LOADING”頁面。將 5 號管連接至廢液瓶，并點擊 “PUMP”按鍵將臭氧水排空。

6、 外泌體濃縮與回收

6.1 、點擊屏幕右上角的切屏按鍵，將屏幕切換至“RUN SETTING”頁面。

6.2 、將經過高壓滅菌的樣品瓶取??，將 4 號管與樣品瓶的進液口連接，1 號管與樣品瓶的回流口連接，2 號管與收集瓶連接，3 號口與濾過液收集瓶連接（樣品瓶、收集瓶、濾過液瓶瓶蓋不得旋死，保證常壓狀態(tài)）。注：樣品瓶必需放在屏幕后的載物臺上，系統(tǒng)在濃縮過程中才能感應液體變化，并依據(jù)設定的參數(shù)自動結束濃縮過程。

6.3 、將經過 0.22μm 濾膜過濾除去細胞碎片的細胞培養(yǎng)液加入樣品瓶中。設置相應的參數(shù)：選擇好樣品的體積，濃縮倍數(shù)，及過濾壓力。點擊“START”按鍵，開始外泌體濃縮。

6.4 、濃縮過程中“RUN SETTING”頁面的下半部分會實時更新并顯示參數(shù)。其中壓力、速度、濾??體積每隔 1S 更新一次，圖表每隔 10S 更新一次。

6.5 、備注：A、另外一種接法為 1 號管保持原樣，將樣品瓶與 5 號管連接（此時 6 號管可以吸入經過 0.22μm 過濾的空氣，補充樣品瓶因濾??導致的瓶內壓力損失。）B、如僅收集濾??液，可保持 1，2 好管原連接不動，5 號管連接至樣品瓶，3 號連接至濾過液瓶。

6.6 、濃縮結束后頁面會自動提示濃縮結束。此時如需要對濃縮的外泌體進行純化，可加入 0.6 倍體積的生理鹽水到樣品瓶中，設定相應的參數(shù)，點擊“START”按鍵進行純化，去除多余的蛋白。

6.7 、重復上述 6.6 過程，即完成全部的純化步驟。

7、 樣品回收

7.1 、點擊屏幕右上角的切換按鍵進行屏幕切換，切換至“COLLECTION”頁面。并確認樣品瓶放置在載物臺上。

7.2 、點擊“PUMP OUT”按鍵，進行樣品回收。

7.3 、系統(tǒng)自動會自動確認將樣品泵至收集瓶，并結束樣品回收程序。

7.4 、如果由于樣品瓶中液面低于管路，導致的樣品瓶中部分濃縮液殘留。可用物體對樣品瓶進行單側墊高，令液面高于進液管路，再次點擊“PUMP OUT”按鍵。

7.5 、重復 7.4 直至樣品完全回收入收集瓶。

7.6 、注：如果收集濾過液，則不需要執(zhí)行此樣品回收程序。

8、 樣品回收后管路清洗

8.1 、將兩個手輪逆時針旋轉，將過濾板上部抬升，而后取出濾膜丟棄。

8.2 、順時針旋轉手輪，將濾板壓合，旋緊手輪。

8.3 、在“COLLECTION”頁面，選擇清洗的液體量，將各個管口歸位至初始的位置（即與射流器連接位置），將去離子水放置在載物臺上，連接 4 號管口與去離子水，5 號口連接廢液缸。

8.4 、選擇清洗量，點按“START”按鍵開始清洗，清洗完畢后，程序自動結束并顯示清洗完成。