近日,第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所第四研究室/全軍交通醫(yī)學(xué)研究所/創(chuàng)傷燒傷與復(fù)合傷國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究人員發(fā)表論文,旨在建立簡(jiǎn)單、可靠的大鼠表皮基底層干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法。研究指出,兩步消化聯(lián)合Ⅳ型膠原差速貼壁法獲取基底層干細(xì)胞簡(jiǎn)易可行,培養(yǎng)的細(xì)胞活力好、表型可靠。該文發(fā)表在2013年第21期《重慶醫(yī)學(xué)》雜志上。
取新生大鼠背部皮膚,采用胰酶兩步消化法獲得單細(xì)胞懸液,Ⅳ型膠原差速貼壁法富集干細(xì)胞,將慢黏附細(xì)胞作為對(duì)照組細(xì)胞,均以角質(zhì)形成細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。以β1-整合素和角蛋白19(K19)雙重?zé)晒馊旧b定細(xì)胞表型,克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞體外增殖能力。
分離培養(yǎng)的細(xì)胞為多角形、呈鋪路石樣排列,倍增時(shí)間約為24h,細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)規(guī)律符合基底層干細(xì)胞的特征。免疫熒光鑒定顯示細(xì)胞共表達(dá)β1-整合素和K19,基底層干細(xì)胞克隆形成能力顯著強(qiáng)于對(duì)照細(xì)胞。
無(wú)血清培養(yǎng)基UltraCULTURE Serum-free Medium
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