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細(xì)胞培養(yǎng)，讓康寧KBM581培養(yǎng)基帶你飛

作者：admin 來源：本站發(fā)布時間： 2017-01-06 18:35　瀏覽次數(shù)：

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很多細(xì)胞治療領(lǐng)域的小伙伴提起康寧KBM581培養(yǎng)基并不陌生。在CIK培養(yǎng)過程中，581以高細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)、突出的細(xì)胞表型和出色的殺傷活力在眾多無血清培養(yǎng)基中脫穎而出。甚至在NK的培養(yǎng)過程中，581也表現(xiàn)優(yōu)異，不僅可以促進(jìn)細(xì)胞因子和抗體活化的NK細(xì)胞高效擴(kuò)增，對于飼養(yǎng)層細(xì)胞支持的NK細(xì)胞培養(yǎng)也效果顯著。小編今天要跟大家分享的是，581還能支持T細(xì)胞，尤其是如今在細(xì)胞治療領(lǐng)域大熱的CAR-T細(xì)胞培養(yǎng)，即使在完全無血清條件下，足夠的CAR-T細(xì)胞數(shù)量可以滿足，其表型也能支持目前臨床試驗的需求。

以下的數(shù)據(jù)來源于國內(nèi)知名CAR-T細(xì)胞治療企業(yè)的臨床試驗。

研究人員首先對比了包括KBM581在內(nèi)的不同品牌的5種無血清培養(yǎng)基在化療病人血液樣本制備CAR-T細(xì)胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化療，分離到PBMC后，用T細(xì)胞分選試劑盒進(jìn)行T細(xì)胞分選，然后用CD3/CD28磁珠活化，同時加入IL-2進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；培養(yǎng)第3天，用連接有CD19-CAR基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)到第14天。與其它商品化的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基相比，581和另一品牌產(chǎn)品Competitor1（Competitor1和Competitor2都被認(rèn)為是最經(jīng)典的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基）獲得了最高的擴(kuò)增效率（8倍，Figure1a）。細(xì)胞表型檢測結(jié)果顯示581和Competitor1的T細(xì)胞純度、CTL比例都符合該實驗室要求。CD8+的CTL比例都超過80%，提示較高的殺傷活性。

figure 1a

figure 1b

Figure1 不同品牌培養(yǎng)基培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)和細(xì)胞表型比較

隨后研究人員比較了581與Competitor1在普通未接受放、化療B-ALL病人樣本中，CAR-T細(xì)胞的擴(kuò)增情況。用同樣的分離、刺激和培養(yǎng)方法擴(kuò)增11天，581體系中CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增42.8倍，高于Competitor1的40.5倍，生長曲線顯示581具有推遲的對數(shù)生長期和更高的擴(kuò)增潛能（Figure2，由于回輸?shù)男枰?xì)胞未繼續(xù)擴(kuò)增）。在其他B-ALL病人和健康人樣本中，研究人員也獲得了相似的結(jié)果。

figure 2

另一個國內(nèi)著名CAR-T細(xì)胞研發(fā)企業(yè)對581和Competitor2 的對比實驗發(fā)現(xiàn)，581與Competitor2培養(yǎng)的CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)、細(xì)胞活率及表型（CD3/CD4/CD8亞群比例,Tn/Tcm/Tem亞群比例，PD-1+細(xì)胞比例等）方面沒有顯著差異，二者都可以支持T細(xì)胞尤其是CAR-T細(xì)胞的高效擴(kuò)增。