在臨床檢測中，常常遇到溶血的標本。溶血對ELISA檢測乙肝表面抗原（HBsAg）究竟是否有影響，各文獻報道很不一致，本文對標本溶血的原因及其對ELISA檢測乙肝表面抗原的影響進行簡要的討論。
1 標本溶血的原因
溶血是臨床檢驗中最常見的一種干擾和影響因素。溶血可分為體內(nèi)溶血和體外溶血 ［1］ 。體內(nèi)溶血可由物理因素（如人工心臟瓣膜或大血管手術后）、化學因素（如惡性瘧）和藥物毒性反應等因素引起。體外溶血可由物理因素（抽血時負壓過大、水浴溫度過高、冰凍、振蕩等機械性破壞）、化學因素（血樣接觸表面活性劑）和代謝因素（如遺傳病引起紅細胞脆性增加）引起。
在臨床上常見的引起標本溶血的原因包括 ［2］ :由于病人嚴重脫水、低血容量休克等原因?qū)е麓┐汤щy造成的溶血;由于抽血器具質(zhì)量不合格如真空管負壓不夠或塑料試管質(zhì)量較差導致的溶血;用干燥管采血為了盡快分離血清用竹簽攪拌不當引起的溶血等。
2 標本溶血對乙肝表面抗原檢測的影響
一些研究沒有發(fā)現(xiàn)標本溶血對HBsAg檢測的影響。李穗芬 ［3］ 對20例HBsAg陰性和10例HBsAg陽性病人的溶血和非溶血標本包括10例OD值在臨界值附近的標本進行了對照，結果非溶血和溶血標本的陰、陽性結果完全一致。20例HBsAg陰性和10例OD值在臨界值附近的樣本，溶血與對應非溶血標本OD值間差異沒有顯著性;10例HBsAg陽性樣品，溶血標本OD值明顯大于對應非溶血標本OD值。因此得出結論，標本溶血不影響HBsAg結果的判定，只是使HBsAg陽性標本的OD值提高。許斌等 ［4］ 對HBˉsAg強陽性樣品的非溶血與溶血（Hb濃度為241g/L）標本的A值作了對照后未發(fā)現(xiàn)兩者有統(tǒng)計學差異，得出結論:溶血對HBsAg的檢測沒有影響（嚴格意義上應表述為:溶血對HBsAg強陽性標本的檢測沒有影響）。單桂秋等 ［5］ 的研究也顯示，HBsAg陽性樣品的非溶血與溶血標本的A值間經(jīng)t檢驗差異無顯著性。
其他的一些研究則發(fā)現(xiàn)，溶血對HBsAg的檢測有影響。錢厚明等 ［6］ 發(fā)現(xiàn)，在17例溶血標本中，初檢的5例HBsAg陽性標本，經(jīng)重新抽血復檢后有2例仍為陽性，另3例轉(zhuǎn)陰。認為是溶血導致了假陽性的出現(xiàn)。劉玉振等 ［7］ 研究發(fā)現(xiàn)，溶血對HBsAg的檢測有影響，當紅細胞濃度>25%造成的溶血可導致假陽性。龍憲和等 ［8］ 研究發(fā)現(xiàn)，無論在健康人還是乙肝病毒感染者中，溶血均導致了ELISA一步法檢測HBsAg假陽性結果的出現(xiàn)，而采用二步法則可以保證結果判讀無誤。
3 標本溶血對乙肝表面抗原檢測影響的可能機制
溶血是由于各種原因造成紅細胞破壞，胞內(nèi)血紅蛋白（Hb）等物質(zhì)和細胞內(nèi)液進入血清。溶血對ELISA的影響主要是反應孔對溶血血清中Hb的非特異性吸附和溶血時細胞內(nèi)液對血清的稀釋作用。單桂秋等 ［5］ 的實驗也證明了溶 血對血清具有稀釋作用。
在ELISA試驗中，酶標反應板孔包被物的濃度是一個相對定值，抗原抗體反應存在最適比例和后帶現(xiàn)象，因此，HBsAg濃度與A值只是在一定的范圍內(nèi)呈一定的線性關系;當HBsAg達到一定濃度時A值的變化進入平臺期;當HBsAg濃度太高時，A值反而會降低。因此，溶血可以使HBsAg濃度很高的樣品的A值升高（在一定程度上解決了后帶現(xiàn)象）;當HBsAg濃度與A值呈線性關系時才會因溶血的稀釋作用使A值下降;當HBsAg濃度近臨界值時，可能造成假陰性。
Hb具有類過氧化物酶活性，其作用與辣根過氧化物酶類似，如果反應孔非特異吸附Hb而殘留，則可催化底物顯色，使本底A值升高甚至造成假陽性。如果洗滌質(zhì)量好，則可能大大減少或排除非特異性吸附的干擾。單桂秋等 ［5］ 的實驗未體現(xiàn)血中Hb非特異性吸附的影響。龍憲和等 ［8］ 采用二步法操作可以排除溶血釋出的Hb對HBsAg檢測的影響也說明洗板質(zhì)量在ELISA檢測中的重要性。
總之，溶血對ELISA檢測HBsAg有一定的影響，影響的性質(zhì)及其大小因所使用的試劑、測定方法、標本HBsAg的有無及濃度高低、洗板的質(zhì)量好壞而異。
參考文獻
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5 單桂秋，蘇建婷.溶血及脂濁樣品對ELISA檢測乙肝表面抗原的影響.臨床檢驗雜志，1999，17（2）:102-103.
6 錢厚明，趙江燕，張燕.應重視ELISA檢測HBsAg灰區(qū)范圍內(nèi)樣品的復檢.上海醫(yī)學檢驗雜志，2002，17（3）:156.
7 劉玉振，張淑琴，馬宏偉.溶血對抗-HCV、HBsAg等測定結果的影響.中國輸血雜志，1999，12（1）:32-33.
8 龍憲和，童華誠.溶血對乙型肝炎五項血清標志物檢測結果的影響.中華醫(yī)學檢驗雜志，1996，19（1）:47-48.
