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有兩種方法可以使細胞適應無血清培養(yǎng)基(SFM): 1.直接適應法式—將細胞直接從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基中。 2.連續(xù)適應或循序隔絕法—分幾步將細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基中。與直接適應法相比較，連續(xù)適應法對于細胞更溫和些。 為了使細胞適應無血清培養(yǎng)基，關鍵是細胞培養(yǎng)應滿足以下條件： 1.處于對數(shù)生長中期 2.存活率大于90% 3.在適應期間，以較高的初始細胞接種量進行接種下面列出了常規(guī)適應步驟。初始細胞接種量、細胞產(chǎn)量和培養(yǎng)周期是連續(xù)優(yōu)化的良好開端。 直接適應 有些類型的細胞可以直接從含有血清培養(yǎng)基適應無血清培養(yǎng)基。 對于直接適應，細胞接種量應在2.5 x 105 -3.5 x 105細胞/ml范圍內(nèi)，當細胞密度達到1 x 106-3 x 106細胞/ml時，傳代培養(yǎng)細胞。培養(yǎng)4至7天后，當細胞密度達到2 x 106 -4 x 106細胞/ml時，細胞已完全適應了無血清培養(yǎng)基。當細胞密度達到1x 106 -3 x 106細胞/ml且存活率為90%時，應當每隔3到5天再次將適應了無血清培養(yǎng)基的貯存細胞在無血清培養(yǎng)基中進行傳代培養(yǎng)。
lonza 無血清 培養(yǎng)基網(wǎng)址鏈接http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2013/0331/5024.html |
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