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小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)主要實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目服務(wù)

作者:admin 來源:本站 發(fā)布時(shí)間: 2017-10-31 21:47  瀏覽次數(shù):
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小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)主要實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目服務(wù)
序號(hào) 服務(wù)項(xiàng)目 具體描述 單價(jià)(元) 實(shí)驗(yàn)周期 備注
1 Luciferase標(biāo)記的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建 先將要使用的腫瘤細(xì)胞用熒光素酶基因標(biāo)記,抗性可選puromycin和blasticidin兩種 3500 2-3周  
2 過表達(dá)某個(gè)基因慢病毒載體構(gòu)建 構(gòu)建進(jìn)帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體,wb檢測(cè)基因表達(dá)情況 1500以上 1-4周 價(jià)格和試驗(yàn)周期需要由基因大小來決定
3 敲減某個(gè)基因慢病毒載體構(gòu)建 構(gòu)建進(jìn)帶有與步驟1中不同抗性篩選的載體,qPCR檢測(cè)基因敲減情況,一般選做3-4個(gè)靶點(diǎn) 2800 1-2周 確保至少一條shRNA敲減效率達(dá)到70%以上
4 過表達(dá)或敲減慢病毒包裝 HEK293T中共轉(zhuǎn)目的基因質(zhì)粒和病毒包裝質(zhì)粒(psPAX2/pMD2.G),48/72小時(shí)后收取病毒上清 2000 1周  
5 過表達(dá)或敲減慢病毒感染腫瘤細(xì)胞株 病毒上清與polybrene混合,感染腫瘤細(xì)胞48-72小時(shí) 1000 2-4天 用第1步驟中的標(biāo)記Luciferase細(xì)胞進(jìn)行該步感染實(shí)驗(yàn)
6 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株篩選 適量濃度的puromycin或blasticidin篩選4-6天,存活的細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增 3000 6-10天  
7 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株結(jié)果驗(yàn)證 WB或qPCR驗(yàn)證過表達(dá)與敲減情況,同時(shí)驗(yàn)證熒光素酶活性 500 2-3天  
8 裸鼠購買   200元/只 1周 一般每組6-10只
9 裸鼠飼養(yǎng)   10元/只/天 4-6周  
10 腫瘤細(xì)胞尾靜脈注射   80元/只 1天  
11 腫瘤細(xì)胞原位注射   50-150元/只 1天 價(jià)格根據(jù)原位操作難度來定
12 活體成像檢測(cè) 裸鼠麻醉,底物熒光素酶注射,儀器檢測(cè)熒光強(qiáng)度 80元/只/次 7天/次  
13 結(jié)果分析 熒光強(qiáng)度分析比較 300元 1周  
14 裸鼠解剖,組織保存 取出肺,淋巴結(jié),肝臟等可能會(huì)有轉(zhuǎn)移的組織,福爾馬林及液氮保存 30元/只 1天  
總計(jì)(元)
    10-14周 /
說明:2,3步驟按照實(shí)驗(yàn)具體情況可選擇其一來做,后續(xù)如果需要做IHC或H&E,另外收費(fèi),其它條件按照客戶特殊實(shí)驗(yàn)要求來協(xié)商定價(jià)

 

 

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